Insulina humana recombinante
Ventajas de la insulina humana recombinante
Resumen El rápido aumento del número de pacientes diabéticos en todo el mundo y la exploración de métodos alternativos de administración de insulina, como la inhalación o la vía oral, que dependen de dosis más altas, aumentarán la demanda de insulina recombinante en un futuro próximo. Las tecnologías de fabricación actuales no podrían satisfacer la creciente demanda de insulina asequible debido a la limitación de la capacidad de producción y al elevado coste de la misma. La fabricación de proteínas recombinantes terapéuticas requiere un organismo huésped adecuado con una maquinaria eficiente para las modificaciones postraduccionales y el replegado de proteínas. La insulina humana recombinante se ha producido predominantemente utilizando E. coli y Saccharomyces cerevisiae para su uso terapéutico en humanos. En esta revisión nos centraremos en los diversos enfoques que pueden aprovecharse para aumentar la producción de insulina biológicamente activa y sus análogos en E. coli y levadura. Las plantas transgénicas son también un sistema de expresión muy atractivo, que puede ser explotado para producir insulina en grandes cantidades para su uso terapéutico en humanos. El sistema de expresión basado en plantas tiene un enorme potencial para la producción de insulina de alta capacidad de manera muy rentable. Un nivel muy alto de expresión de proinsulina biológicamente activa en semillas u hojas con estabilidad a largo plazo, ofrece una tecnología de bajo coste para la administración tanto inyectable como oral de proinsulina.
Marcas de insulina humana recombinante
Esta es una proteína recombinante adecuada para su uso como control en aplicaciones ELISA y Western blot.La insulina liofilizada es estable a temperatura ambiente durante 3 semanas. Reconstituir en HCl estéril 0,005N hasta una concentración no superior a 1mg/mL. Almacenar el producto liofilizado a -20°C. Tras la reconstitución, almacenar a 4°C durante 2-7 días o alicuotar y almacenar a -20°C. Para el almacenamiento a largo plazo, añadir HSA o BSA al 0,1%. Evitar ciclos repetidos de congelación y descongelación.
La insulina es una hormona peptídica secretada por las células beta de los islotes pancreáticos. Regula el metabolismo de los hidratos de carbono, las proteínas y los lípidos al potenciar el transporte por la membrana de la glucosa, los aminoácidos y ciertos iones. También favorece el almacenamiento de glucógeno, la formación de triglicéridos y la síntesis de proteínas y ácidos nucleicos. La insulina es un producto polipeptídico de 51 aminoácidos producido a partir de un péptido precursor, la proinsulina. La proinsulina se escinde después de la traducción en dos cadenas (péptido A y péptido B) que están unidas covalentemente mediante dos enlaces disulfuro y una molécula de péptido C. La deficiencia de insulina da lugar a la diabetes mellitus, una de las principales causas de morbilidad y mortalidad en la población general. La insulina también está presente en los tumores de origen celular b, como el insulinoma.
Producción de insulina humana recombinante
La insulina regula la captación, la utilización y el almacenamiento celular de la glucosa, los aminoácidos y los ácidos grasos e inhibe la descomposición del glucógeno, las proteínas y las grasas. La insulina humana recombinante se utiliza habitualmente durante el cultivo de diversas líneas celulares. Este suplemento de medio libre de suero es esencial para el crecimiento a largo plazo de las líneas celulares de mamíferos más utilizadas. La insulina humana recombinante no es de origen animal y se expresa en levadura. Proporciona una excelente calidad, rendimiento y consistencia entre lotes.
Producción de insulina recombinante pdf
La insulina humana recombinante es una proteína homodimérica ligada al disulfuro que consta de 51 residuos de aminoácidos y migra como una proteína de aproximadamente 6 kDa en condiciones no reductoras y reductoras en SDS-PAGE. La secuencia de ADN optimizada que codifica la cadena madura de la insulina humana se expresó en E. coli.
La proteína liofilizada es estable durante al menos 2 años desde la fecha de recepción cuando se almacena a -20°C. Tras la reconstitución, almacenar en alícuotas de trabajo a +4°C hasta un mes, o a -20°C hasta seis meses, en presencia de una proteína portadora. Evitar ciclos repetidos de congelación/descongelación.